Coenzymbereitstellung in Saccharomyces cerevisiae zur Ganzzell-Biokatalyse

Andreas Knepper, Dissertation Technische Universität München, 2007

Viele Feinchemikalien können durch asymmetrische Biosynthesen gewonnen werden. Dabei bieten ganze Zellen als Biokatalysatoren den Vorteil, dass sie die dazu benötigten Coenzyme NAD(H) oder NADP(H) bereits enthalten. Jedoch wird bei der Ganzzell-Biokatalyse oftmals festgestellt, dass die zellinterne Coenzym-Konzentration während der Reaktion zu gering ist und damit nur eine geringe Halbwertszeit des Biokatalysators erreicht wird. Im Rahmen dieser Arbeit sollten daher am Beispiel einer rekombinanten Saccharomyces cerevisiae Strategien zur Herstellung Coenzym-angereicherter Ganzzell-Biokatalysatoren entwickelt werden. Mit Hilfe reaktionstechnischer Untersuchungen konnte durch eine geeignete Dosierung von Vorläufermetaboliten der Coenzymbiosynthese bei der Herstellung dieser Hefe im Zulaufverfahren die intrazelluläre NAD(H)-Konzentration um den Faktor 10 und die intrazelluläre NADP(H)-Konzentration um den Faktor 4 gesteigert werden.

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Publikationen

• Knepper A, Schleicher M, Klauke M, Weuster-Botz D (2008): Enhancement of the NAD(P)(H) pool in Saccharomyces cerevisiae. Eng Life Sci 8: 381-389.